磷含量分析

土壤磷的檢測使用Zr-Oxide DGT裝置。Zr-Oxide DGT經過土壤樣品暴露后，按照以下流程測定磷。

溶液提取法

1) 回收固定膜：從裝置中取出Zr-Oxide固定膜圓片，用少量去離子水沖洗膜表面。

2) 提取：將固定膜放入20mL的離心管中，加入10mL 1 mol L-1 NaOH，室溫下靜置 提取24h取出固定膜，保存提取液待測定。

3) 磷測定：采用磷鉬藍顯色法，紫外分光光度計測定；微量樣品采用96微孔板分 光光度計法，可在1分鐘內一次性分析96個樣品。

微孔板分光光度法：

顯色劑配置：量取 194.6mL 的濃硫酸，緩慢加到 500mL 的去離子中，待冷卻，然后 稱取 20g 鉬酸銨[(NH4)6Mo7O24·4H2O]和 0.5g 酒石酸銻鉀[K(SbO)C4H4O6·1/2H2O] 分別 于 100mL 水中溶解，兩者緩慢加入到上述稀釋冷卻后的濃硫酸中，定容至 1000mL。 該溶液作為儲備液貯存于棕色試劑瓶中，在冷處可保存數月。磷微量比色分析前，稱 取 1.5g 抗壞血酸溶于 100mL 儲備液中。用于制備溶液的所有試劑均為分析級。 測定流程：吸取適量 NaOH 提取液至 96 孔酶標板微孔中，確定合適的稀釋倍數，按 樣品與 2M H2SO4 比例 4:1（體積比）加入 2M H2SO4進行酸堿中和，總體積為 200 μL。 加入過程中若產生氣泡，需進行離心消除。隨后，按樣品與顯色劑 10:1（體積比）加 入顯色劑 20 μL，加樣的酶標板置于 35℃微型振蕩器中恒溫振蕩顯色 45min，然后通 過微孔板分光光度計在 700nm 波長下讀取每個微孔的吸光值，扣除該微孔的空白吸光 值后，得到每個微孔中提取液的吸光度，根據標線換算成提取液濃度。